Trypsine

La trypsine est une enzyme digestive du suc pancréatique qui a pour but de digérer les protéines.



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Enzyme - EC 3.4.21

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Définitions :

  • Un genre d'enzyme qui a employé dans le laboratoire pour séparer les cellules de leur milieu de culture. (source : library.thinkquest)
Trypsine et trypsinogène

La trypsine est une enzyme digestive du suc pancréatique qui a pour but de digérer les protéines.

Synthèse

Elle est synthétisée par le pancréas sous forme de trypsinogène (prœnzyme inactive), puis stockée dans les vésicules enzymatiques des cellules acineuses d'où elle est excrétée au moment de la digestion. L'activation du trypsinogène en trypsine est le résultat de l'hydrolyse d'un propeptide sous l'effet de l'entérokinase ou par un effet d'autoactivation de la trypsine par elle-même. La cholecystokinine-pancréozymine active la sécrétion des enzymes (donc de la trypsine) dans le suc pancréatique.

Activité enzymatique

La trypsine est une endoprotéase qui hydrolyse les liaisons peptidiques dans lesquelles un acide aminé basique (Lysine (Lys), Arginine (Arg) ) engage sa fonction acide. Elle coupe en C-terminal de ces acides aminés. En d'autres mots, elle transforme les chaînes polypeptidiques en chaînes protéiques plus courtes pour permettre la digestion. Stable à pH acide (<7), elle est inactivée et digérée en quelques heures à pH neutre (=7) dans l'intestin.

La trypsine participe à l'activation d'autres enzymes comme l'alpha-chymotrypsine par coupure hydrolytique de la chaîne polypeptidique du chymotrypsinogène.

Cette enzyme sert aussi lors de la 2éme semaine du developpement embryonnaire humain. Elle est sécrétée par le trophoblaste pour "digérer" la zone pellucide entourant le blastocyste. Ce phénoméne se nomme l'éclosion.

Pathologies associées

Dans la pancréatite et la mucoviscidose, la trypsine étant mal évacuée, elle est la principale cause de la réaction inflammatoire du pancréas.

Utilisation

La trypsine se retrouve chez la majorité des animaux. cette enzyme est particulièrement utilisée pour des approches de recherche en protéomique, particulièrement pour la caractérisation et séquençage de protéines.

Elle est aussi utilisée en spectrométrie de masse spécifiquement en protéomique ainsi qu'en imagerie.

La trypsine est utilisée en culture cellulaire pour détacher les cellules cultivées en flasque de culture (car les cellules sont particulièrement étalées dans la flasque). L'action de la trypsine est inhibée par un ajout de serum de veau feotale ; les cellules se retrouvent alors en solution. Ce traitement est quotidiennement utilisé en biologie cellulaire pour augmenter les cultures cellulaires (en passant à une flasque de culture plus grande ou en multipliant les flasques) ou pour compter les cellules via un compteur de cellules (FACS, pour "Fluorescence-activated cell sorting").

La trypsine est aussi utilisée en immuno-hématologie pour la recherche des anticorps irréguliers ou encore lors de l'établissement d'un caryotype : elle permet, en collaboration avec le Giesma, la naissance de bandes G sur l'ADN et par conséquent l'identification précise des chromosomes. Une anomalie chromosomique peut être ainsi détectée.

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